مساكم الله بالخير يا مختبرجية 🌞، اليوم بنتكلم عن موضوع جداً مثير للأهتمام وينظر له كمستقبل مزهر للمختبر الطبي بحيث يوفر دقة وسرعة في الاستقصاء التشخيصي السريري الي هو التقنيات الجزيئية 🧬(molecular techniques) اليوم بسرد لكم التقنيات الجزيئية المتعارف عليها في المختبرات الطبية..
مع لمحات عن ماهية كل تقنية 🙄؟.
أولا ًتعريف عام عن التقنيات الجزيئية المرضية :
تقنية تستخدم للكشف عن التسلسل الحمضي الاميني للأمراض مما يمنح دقة وسرعة في التشخيص وتحديد المئال المرضي لها عن طريق مُختلف السوائل الجسمانية والانسجة.
نقسمها الان لثلاث اقسام رئيسية ونستطرد في كل قسم:
أولا ًتعريف عام عن التقنيات الجزيئية المرضية :
تقنية تستخدم للكشف عن التسلسل الحمضي الاميني للأمراض مما يمنح دقة وسرعة في التشخيص وتحديد المئال المرضي لها عن طريق مُختلف السوائل الجسمانية والانسجة.
نقسمها الان لثلاث اقسام رئيسية ونستطرد في كل قسم:
1: amplification techniques 🧬
هذه التقنية تستهدف تكثير او تضخيم التسلسل الحمضي النووي المسؤول عن الاضطراب او الجسيم الممرض وتحديده والمساعدة على اكتشافه وتحديد نوعه. من انواعها التقنية المشهورة،
🧬PCR (Polymeric chain reaction)
هذي التقنية تستخدم على نطاق واسع في تشخيص...
هذه التقنية تستهدف تكثير او تضخيم التسلسل الحمضي النووي المسؤول عن الاضطراب او الجسيم الممرض وتحديده والمساعدة على اكتشافه وتحديد نوعه. من انواعها التقنية المشهورة،
🧬PCR (Polymeric chain reaction)
هذي التقنية تستخدم على نطاق واسع في تشخيص...
الأمراض سواءً الناتجة عن عدوى او اعتلالات استقلابية او تطفرية ، نأتي الان لطريقة عمل ال PCR التقليدية وكيف يتم التفاعل الداخلي, بالخطوات.
1- denaturation
على درجة حرارة 94 مئوية نسخن ال DNA حتى يفك معانا ويصير التسلسل الاميني مُعرى تماماً
1- denaturation
على درجة حرارة 94 مئوية نسخن ال DNA حتى يفك معانا ويصير التسلسل الاميني مُعرى تماماً
2-annealing
ننزل الحرارة ل 55 مئوية حتى نسمح لل primer الي هو تسلسل حمضي اميني مُخلق مُضاف للعينة الهدف منه يشربك على الجزء الي نبغى نكتشفه ونستهدفه ويكون متطابق معاه.
ننزل الحرارة ل 55 مئوية حتى نسمح لل primer الي هو تسلسل حمضي اميني مُخلق مُضاف للعينة الهدف منه يشربك على الجزء الي نبغى نكتشفه ونستهدفه ويكون متطابق معاه.
3- Extentions
هنا نرفع الحرارة ل 72 درجة مئوية من اجل تمدد ال primer وإضافة ( Taq polymerase) الي فايدته يصنع لنا نسخ كثيرة من الDNA المتشربك ب ال Primer حقنا عشان يكثر عدده من اجل تسهيل اكتشاف الجزء المستهدف مع إضافة مادة كاشفة مرتبطة تعطي توهج في الجزء المكتشف من اجل قرائتها..
هنا نرفع الحرارة ل 72 درجة مئوية من اجل تمدد ال primer وإضافة ( Taq polymerase) الي فايدته يصنع لنا نسخ كثيرة من الDNA المتشربك ب ال Primer حقنا عشان يكثر عدده من اجل تسهيل اكتشاف الجزء المستهدف مع إضافة مادة كاشفة مرتبطة تعطي توهج في الجزء المكتشف من اجل قرائتها..
او أستخدم ال(gel electrophoresis) الطريقة القديمة
يوجد انواع كثيرة لل PCR بنذكر أبرزها،
1-reverse-transcriptase PCR
في هذا النوع نعكس ال mRNA الموجود في العينة ل cDNA بواسطة انزيم (Reverse-transcriptase) لأن ال cDNA اكثر ثباتا ًوايضاً نستخدم هذه التقنية مع فيروسات RNA ، نفس خطوات ال PCR اللهم اننا نضيف خطوة أولية تحتوي...
1-reverse-transcriptase PCR
في هذا النوع نعكس ال mRNA الموجود في العينة ل cDNA بواسطة انزيم (Reverse-transcriptase) لأن ال cDNA اكثر ثباتا ًوايضاً نستخدم هذه التقنية مع فيروسات RNA ، نفس خطوات ال PCR اللهم اننا نضيف خطوة أولية تحتوي...
انزيم ال reverse-transcriptase في البداية والباقي نفسها.
2-real time PCR.
الفرق هنا في النوع ذا اننا نقدر نشوف النتيجة ونحللها اثناء العملية بحيث اننا نشوف النتيجة على شكل توهج ينقري بواسطة قارئ ضوئي عددي quantitative ونستخدم نوع من ال probe المشع المرتبط ب ال Primer بحيث...
2-real time PCR.
الفرق هنا في النوع ذا اننا نقدر نشوف النتيجة ونحللها اثناء العملية بحيث اننا نشوف النتيجة على شكل توهج ينقري بواسطة قارئ ضوئي عددي quantitative ونستخدم نوع من ال probe المشع المرتبط ب ال Primer بحيث...
اثناء مرور ال taq polymerase يحرر الصبغة من على ال probe ويعطينا توهج ينقري بواسطة قارئ ضوئي يكشف لنا وجودية التسلسل المستهدف من عدمه، وهذا النوع المستخدم في كشف جائحة فايروس كورونا، أسأل الله ان يكشف الغمة
، من مميزات تقنية ال PCR سرعة ودقة النتائج وتقليص فترة التشخيص وما يترتب عليها من اعباء صحية واقتصادية على النظام الصحي وحتى على المريض نفسه. ولكن تظل اكبر مشكلة تواجه هذه التنقية الي هي التلوث (contamination) بحيث اغلب الأخطاء بسببه ،كذا خلصنا جزئيتنا الاولى.
2- blotting techniques 🔗
التقنية هذي نطمح فيها نستهدف بروتين او تسلسل حمض نووي معين لجسيم ممرض وحتى نستخدمه للكشف عن تسلسل لبعض الاعتلالات المرتبطة بطفرات وراثية وينقسم لثلاث انواع رئيسية ،
1-westren blot:
في هذي التقنية نستهدف بروتين معين ومخصص ومميز للي نبي نكشف عنه مثلاً...
التقنية هذي نطمح فيها نستهدف بروتين او تسلسل حمض نووي معين لجسيم ممرض وحتى نستخدمه للكشف عن تسلسل لبعض الاعتلالات المرتبطة بطفرات وراثية وينقسم لثلاث انواع رئيسية ،
1-westren blot:
في هذي التقنية نستهدف بروتين معين ومخصص ومميز للي نبي نكشف عنه مثلاً...
ال(HIV) يعتبر هذه التقنية من اختباراته التأكيدية ويعتبر نوع التفاعل فيه بين Ab مُخلق ضد ال Ag المتواجد في عينة المريض الي هوا البروتين المستهدف، ويكون ال Ab مشع بصبغة فسفورية بحيث يشع عند ارتباطه بالبروتين المستهدف والمقصود.
2- southern blot :
هنا نستهدف الحمض النووي ال DNA المسؤول عن بعض الامراض المراد التقصي عنها عن طريق Probe DNA مشع يستهدف التسلسل المقصود ويلتصق فيه ثم يظهر لنا بشكل خطوط في نهاية العملية تحت اشعة x-ray
هنا نستهدف الحمض النووي ال DNA المسؤول عن بعض الامراض المراد التقصي عنها عن طريق Probe DNA مشع يستهدف التسلسل المقصود ويلتصق فيه ثم يظهر لنا بشكل خطوط في نهاية العملية تحت اشعة x-ray
3-northern blot :
في هذه التقنية نستهدف الحمض النووي RNA المسؤول عن بعض الاعتلالات او المراد التقصي عنه بحيث نستخدم طريقة تهجين ونكلبش عليه ب cDNA مشع ثم نستعرضه عن طريق تعريضه لأشعة اكس
في هذه التقنية نستهدف الحمض النووي RNA المسؤول عن بعض الاعتلالات او المراد التقصي عنه بحيث نستخدم طريقة تهجين ونكلبش عليه ب cDNA مشع ثم نستعرضه عن طريق تعريضه لأشعة اكس
* ملاحظة : طرق الاستعراض او (visualizing) ممكن تتم بأكثر من طريقة بحيث ممكن ان يكون هناك Ab مرتبط بأنزيم مشع مثل ال HRP ويمر بفترة بعدين نستخدم substrate مثل TMP عشان يتفاعلون ويعطوني لون ( مثل ال ELISA) او ممكن ان عندنا Ab بس مرتبط ب صبغة فسفورية ونشوفه عن طريق تسليط اشعة ال...
الاشعة مافوق البنفسجية (Ultra violent) فهناك اكثر من طريقة ولكن البروتكول بشكل عام موحد. كذا خلصنا الجزء الثاني من التقنيات نجي للجزء الأخير.
3- Hybridization techniques :
التقنية هذي عبارة عن استهداف لتسلسل DNA معين بواسطة DNA probe مشع متطابق مع الجزء المستهدف ويعطي اشعاع نقدر نشوفه تحت ال (fluorescent microscope)
التقنية هذي عبارة عن استهداف لتسلسل DNA معين بواسطة DNA probe مشع متطابق مع الجزء المستهدف ويعطي اشعاع نقدر نشوفه تحت ال (fluorescent microscope)
** ملحوظة في أنواع متعددة لل FISH Probe تبينها الصورة ذي ممكن نستهدف اماكن محددة من الكروموسوم المراد.
3-DNA microarray 🧬
التقنية هذي تستهدف اكتشاف البروز الجيني لبعض التسلسلات الجينية المراد اكتشافها سواء لخلية سرطانية او جسيم ممرض او خلية معينة او تحديد جين معين مسؤول عن اعتلال او صفة جينية مراد اكتشافها في خلية معينة عن طريق شريحة فيها مئات الألوف من التسلسلات الجينية..
التقنية هذي تستهدف اكتشاف البروز الجيني لبعض التسلسلات الجينية المراد اكتشافها سواء لخلية سرطانية او جسيم ممرض او خلية معينة او تحديد جين معين مسؤول عن اعتلال او صفة جينية مراد اكتشافها في خلية معينة عن طريق شريحة فيها مئات الألوف من التسلسلات الجينية..
المعلومة ، ونضع عليها عينتنا المراد اكتشاف الجين المراد التقصي عنه فيها ويتم بينهم ارتباط هيدروجيني بين عينتنا والتسلسل الجيني المطابق لها في الشريحة وطبعاً عينتنا تكون مرتبطة بجزيئ مشع يساعدنا على رؤية التفاعل بين الجينات المراد اكتشافها
والان نتكلم عن استخدمات كل التقنيات المذكورة أعلاه في مجال المختبرات الطبية التشخيصية ، نستخدمها في التقصي عن الامراض والسرطانات سواء كانت بسبب عدوى بسبب بكتيريا او فايروس او طفيلي او فطر او امراض وراثية او استقلابية فالمجال جداً جداً واسع ويعتبر بحر ماله شاطئ 🌞🌧️
وكذا خلصنا أبرز التقنيات الجزيئية المرضية المستخدمة في مجال المختبرات الطبية التشخيصية وان شاء الله اني قدرت الخصها بشكل مبسط للملمين والمعذرة على القصور
🧬❤️🌿
@haya_lab @Rawan_lab @elyazeed7 @Anas_Index @maudi_ahmed @DrAlqumber @naifalmontashir @assiriama @labthology
🧬❤️🌿
@haya_lab @Rawan_lab @elyazeed7 @Anas_Index @maudi_ahmed @DrAlqumber @naifalmontashir @assiriama @labthology
Loading suggestions...