Rattibha

مساء الخير
ثريد ب رمضان غير😂😅
اليوم راح اتكلم Real time pcr 🧪

هو مجرد صوره معدله من PCRالعادي
هو تفاعل من خلاله اقدر اقطر DNA اللي موجود بالعينة 🧬.

التفاعل من خلاله اقدر اعمل الامبلفيكشن او اقدر اقطر DNA يتم عن جهاز (الثرموسايكل )

هو من اسمه يعني يعمل دورات مختلفه من درجات الحرارة مرا يخلي درجة الحراره عالية مرا منخفضة مرا يرجع يخليها عاليه طيب ليش!🌡
عشان يقدر يعمل لنا الخطوات الرئيسة لجهاز pcr
🧪

طيب ايش هما الخطوات ايش يعملو !!:
بالبداية مثل م نعرف DNA هو عباره عن double standards نشبهم بشريطين ماسكين ببعض 🧬
يعني مثلا لو في جين موجود في DNA وانا ابغا اقطرو

🧬
اول خطوه هو لازم افصل double standards
عن بعضهم
يتم من خلال خطوة (denaturation )
بدرجة حراره٩٤-٩٥
🧬🧬
هو لم ينفك الشريطين عن بعضهم يكون موحود شي اسمه بلايمر
هو عبارة عن سلسله مسؤول هو ان يمسك بالجين اللي احنا نبغا نقطرو وبدرجة منخفضة٥٥-٦٠
من خلال خطوة annealing

🧬🧬🧬
الخطوه extension
لازم يكون موجود TAQdna
هو مسؤول عن تحفيز ونمو سلسله جديده من DNA

طيب ايش الفرق بين PCR العادي و Real time pcr
!!?!!
اولا pcr العادي نقدر من خلاله نقطر DNA بس م نقدر نعرف هو كم تقطر عندنا نسخه من DNA والتفاعل موجود !!!! بس نقدر نعرف كمية النسخ الموجوده بعد م ينتهي التفاعل 🧬🧬🧬🧬

اما Real time pcr
يعني نقدر نعرف كم نسخه DNA تقطرت اثناء تفاعل PCR هو يشتغل 🧬🧬🧬🧬🧬🧬🧬🧬🧬

طيب ايش هو جهاز Real time pcr

اول شي يتكون من الثرموسايكل زي pcr العادي
مسؤول عن الامبلفيكشن
طيب ايش يختلف عن العادي !!!!!!!
يكون موجود مصدر ضوء ،،،كامير 🧬

هو مصدر الضوء ينزل ضوء على الجين اللي تقطر
والجين يطلع لنا اضاءه عشان الكامير تقدر تصورها ونعرف الجين تقطر 🧬🧬🧬🧬
كيف هذا كلو ينعمل
طيب خلونا بالبداية نعرف مكونات Real time pcr

راح نلاحظ نفس مكونات pcr العادي
DNA هو الحين اللي نبغا يقطر
DnTPS هيا (nucleotide)
مسؤول عشان يسير عندنا الشريط الجديد
هو المسؤول عن الجين اللي نبغا نقطرو primer
انزيم DNA polymerase
🧬🧬🧬🧬🧬🧬🧬

الزياده هو 👇🏻
fluorochromesراح يمتص الضوء بعدها يطلق ضوء معين عشان الكامير تقدر تصورها من خلالها نعرف حصل امبلفيكشن 🧪🧪🧪

انواع fluorochromes